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假定蛋白LOC677340ELISA試劑盒檢測程序發表時間:2024-09-20 13:20 假定蛋白LOC677340ELISA試劑盒檢測程序: 1假定蛋白LOC677340ELISA試劑盒加樣:空白孔加入 100μl 標準品/樣品稀釋液,其余孔各加入標準品或待測樣品 100ul, 將反應板混勻后置 37℃,60 分鐘。 2.棄液:棄去液體,甩干,不用洗滌。 3.加抗體:每孔加入 100ul 生物素標記抗體工作液100ul,混勻后置 37℃,60 分鐘。 4.洗板:用 1×洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,每孔加入 1×洗液 350μl,每次震蕩/浸泡 1-2 分鐘,在濾紙上拍干。 5.加酶結合物:每孔加入酶結合物工作液 100ul,混勻后置 37℃,30 分鐘。 6.洗板:同步驟4。 7.加顯色液:每孔加入提前配置好的 TMB 混合液 100ul,混勻后置 37℃暗處反應 10-20 分鐘(具體顯色時間根據顯色結果而定)。 8.加終止液:每孔加入 50ul 終止液,混勻,用酶標儀在 450nm 處測吸光值。9. 結果分析:讀取酶標儀上的吸光值后,需進行數據處理。首先,以標準品的濃度為橫坐標,對應的吸光值為縱坐標,繪制標準曲線。確保標準曲線呈良好的線性關系,這是結果準確性的關鍵。接著,將待測樣品的吸光值代入標準曲線方程中,通過計算得出樣品中LOC677340蛋白的濃度。 |
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